固定（fixation）的主要目的在于保持细胞的自然形态，防止细胞自溶或细菌性腐败，保持细胞内蛋白质、糖等成分易于着色。

（一）常用固定液

1. 95%乙醇固定液    为最常用的固定液，适合大规模防癌普查时使用，但渗透性较差。如加入1%量的冰醋酸，可增强固定效果，并有对抗乙醇固定的收缩作用。

2. 乙醚乙醇固定液    此固定液渗透性强，固定效果好，适于一般细胞学染色，如巴氏染色和HE染色。

3.三氯甲烷乙醇固定液    又称卡诺（Carnoy）固定液，穿透力强，固定效果好。

（二）固定方法

1. 带湿固定法   即涂片尚未干燥时即进行固定的方法，适用于痰、宫颈刮片及食管拉网涂片的固定，不适用于太稀薄的标本。可将涂片直接浸入容器的固定液中浸泡（浸入法）10-30分钟，但是细胞容易脱落，引发交叉污染，因此固定时应该分瓶固定，固定液回收时要过滤，多数标本用此法固定。或把涂片平放在染色架或桌面上，把固定液滴加在涂片上盖满涂片膜（滴加法），此法可防止细胞脱落。常用于需做瑞氏或 MGG染色的胸腹腔积液、尿及穿刺细胞涂片。

2. 干燥固定法   待涂片自然干燥，再滴加或浸入固定液进行固定。

（三）注意事项

（1）固定液要根据染色要求，选用合适的固定液。如巴氏或 HE 染色，应选用95%乙醇固定，进行 MGG 染色可选甲醇固定液，而瑞氏染色则以自然干燥固定为宜。

（2）防止交叉污染，保持固定液浓度。当乙醇固定液浓度低于90%时，要及时更新固定液。

（3）液体标本涂片后，应将其在空气中放置片刻，待涂膜周边稍干而中央尚未干时再浸入固定液固定（潮干固定），如等全部细胞干燥后再固定，染色后细胞肿胀、核染色质结构模糊不清此称为人为退变，将严重影响诊断结果。

（4）标本固定时间因涂片多少与固定液不同而异，一般固定不少于15分钟。固定时间一到要及时染色。穿透力强的固定液固定后不可过夜染色。