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常用的固定液

发布时间:2024-01-18 19:20 本文来源: 病理科

    一种好的固定液,应具有以下特性:①渗透力强,能迅速渗人组织内部;②不会使组织过度收缩或膨胀;③ 能硬化、固化组织,使细胞成分的形态和位置与生活状态时相似;④使组织对染料产生较强的亲和力,并产生较佳的折光率。固定液可分单纯固定液和混合固定液两类。

    1.单纯固定液   是指由一种化学物质组成的固定液。此类固定液包括:甲醛、乙醇、乙酸、重铬酸钾、苦味酸、丙酮、氯化汞、铬酸、锇酸等,常用的如下。

(1)甲醛(福尔马林):为一种可溶于水的无色气体,极易挥发,有强烈的刺激性气味,市售为37%~40%甲醛水溶液,用于固定的甲醛溶液浓度为4%,是 40%甲醛溶液和水按1:9比例配制而成。甲醛是一种还原剂,易被氧化成甲酸,故不能和锇酸、重铬酸钾及铬酸等氧化剂混合。甲醛渗透力强,组织收缩小,能较好硬化组织。甲醛溶液能固定蛋白质,但不使白蛋白、核蛋白沉淀。甲醛溶液是脂肪、类脂和神经组织最佳固定液,也可用于固定线粒体、高尔基复合体,甲醛溶液还是糖的保护剂。甲醛溶液固定的组织细胞核着色良好,但固定时间较长时因酸化作用而使细胞核着色欠佳,含血较多的组织可形成黑色或黑褐色的色素,即甲醛色素。

(2)乙醇:为无色液体,可与水以任何比例混溶。乙醇是一种还原剂,易被氧化成乙醛,再变为醋酸,故不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合。用于固定的浓度以80%~95%最好。乙醇具有固定、硬化、脱水作用。乙醇的渗透力较弱,固定速度较慢,用其固定的标本取材要薄。乙醇对糖原、纤维蛋白和弹性蛋白有良好的固定效果。被乙醇沉淀的核蛋白仍能溶于水,使核着色不良,故乙醇不宜用于染色体的固定。高浓度乙醇硬化作用强,组织变脆、收缩严重,导致组织固定不均,故不宜单独使用或留置组织过久。用70%~80%乙醇可较久地留置组织,或先用80%乙醇固定数小时,再移入95%乙醇固定,这样可避免组织过度收缩、变硬。50%以上的乙醇可溶解脂肪及类脂质,若需保留这些物质,不能用乙醇作为固定液。

(3)乙酸(醋酸、冰醋酸):是具有刺激气味的无色液体,可与水、乙醇以各种比例混溶,用于固定的派度为0.3%~5%。醋酸穿透力强,染色质固定快,一般大小的组织只需圖定30~60分钟即可,但可使组织膨胀,一般不单独使用,常与乙醇配制成混合固定液,以抵消乙醇所致的组织收缩和硬化。醋酸可抑制细菌和酸的活性,防止自溶。对糖、脂肪、类脂无固定(保存)作用,但可使核蛋白沉淀,细胞核显示清晰,是染色体最佳固定液。用醋酸固定的组织不必水洗,可直接移人50%或70%乙醇中。

2. 混合固定液   是指由多种化学物质混合组成的固定液。实际工作中多使用混合固定液,其固定效果明显优于单纯固定液。

中性甲醛液:具有渗透力强、组织收缩小、染色效果好的特点。可用作常规固定液或标本保存液,脂肪染色常用此液固定。中性甲醛液还能保存大多数抗原物质,提高免疫组化检测的阳性率,因此,是免疫组化最常用的固定液。固定时间一般为6~24小时。此液中甲醛的浓度力6%~8%。混合固定液有多种,目前我科经过多种试剂对比选用中性甲醛液。

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常用的固定液