冷冻切片又称冰冻切片，是将组织冷冻后直接进行切片，不经过固定、脱水、透明、浸蜡、包埋等过程，极大地缩短了制片的时间，是一种简便快速的制片方法，对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义。由于冷冻切片制作时不用乙醇和二甲苯，对脂肪、类脂质和酶的保存较好，因此，冷冻切片也常用于脂肪染色、神经髓鞘的染色，以及组织化学和免疫组织化学染色。

    新鲜组织、已固定的组织和低温冰箱冷藏的组织块等均可用于冷冻切片，但已固定的组织块需经流水冲洗后方可进行冷冻切片。

   1. 制作过程    冷冻切片的制作一般经过取材一固定（或不固定）—组织速冻一冷冻切片一贴片（或不贴片）一染色等过程。以下介绍主要制片过程。

（1）取材：送检的组织应尽可能新鲜，不应有过多的水分，以避免冰晶形成时造成组织变形。选取最有代表性的部位，如有必要可取多个组织块。由于组织块越薄，冷冻的速度越快，因此，组织块的厚度以1~2mm 为宜，一般不超过3mm。

（2）固定：采用二氧化碳冷冻设备制作冷冻切片，需对组织块固定后再行冷冻切片。若用恒冷箱切片机切片，组织可以固定，也可以不固定。如无特殊要求，病理急诊、术中诊断、组织化学和免疫组织化学染色等，一般都用新鲜组织直接冷冻，切片后再进行固定、染色或直接染色或孵育。

（3）切片：不同的冷冻切片机，操作不同。

   注意事项

（1）用于冷冻切片的组织，在切片前不能用乙醇固定，否则无法冷冻。

（2）送检组织应尽可能新鲜。

（3）取材时组织块的大小要适当，过厚妨碍速冻，过薄可能导致制片失败。

（4）为减少冰晶形成对组织结构的挤压和破坏，组织的冷却速度要快，使组织的温度迅速降到一4°C以下。

（5）组织周围的包埋剂应适量，过少起不到包埋作用，过多影响冷冻效果。

（6）冷冻时间太久的组织不能马上切片，以免损伤切片刀。

（7）调节好冷冻切片机的温度，使组织块的硬度处于最佳切片状态。

（8）组织块复温时，应在37°C加温速融，避免自然复温对组织结构的破坏。

（9）太小、太碎的组织不宜做冰冻切片，应改用快速石蜡切片。

（10） 通常骨组织和钙化组织不能做冷冻切片。